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產品選擇指南

技術服務信息

當前位置:首頁> 產品選擇指南 > 一般PCR相關制品 > Takara優選酶 > TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase
TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase
品牌 Code No. 產品名稱 包裝量 價格(元) 說明書 數量
Takara RR370A TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase 200 Rxns ¥998
Takara RR370B(A×4) TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase 800 Rxns ¥3,872
Takara RR370S TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase 40 Rxns ¥283
Takara RR371A TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase Dye plus 200 Rxns ¥998
Takara RR371B(A×4) TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase Dye plus 800 Rxns ¥3,872
Takara RR371S TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase Dye plus 40 Rxns ¥283
無標題文檔
 
粗提液制備 RNA提取 DNA Markers PCR儀器
 
 
■ 制品內容 (Code No. RR370A/RR371A,50 μl反應體系×200次)
RR370S TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase (2×) 1 ml
RR370A TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase (2×) 1 ml×5
RR371S TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase Dye plus (2×) 1 ml
RR371A TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase Dye plus (2×) 1 ml×5
 
■ 制品說明
TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase是基于Thermococcus屬古細菌來源的DNA polymerase新研發的α型PCR酶。
本制品通過優化酶和buffer,提高了對一般PCR試劑難以擴增的GC/AT rich、長鏈、粗提樣品的擴增成功率。并且具有卓越的校對能力,保持了α型DNA聚合酶具有的高保真性,獲得的PCR擴增結果特異性高,可用于克隆。
本制品是PCR反應用的DNA Polymerase、Buffer、dNTP Mixture的2倍濃度的混合物。由于在-20℃下保存不會凍結,所以不需要融化,可以直接加入引物和模板進行PCR擴增。
此外,TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase Dye plus(Code No. RR371)版本中,已含有電泳時所必需的色素試劑 (綠色:藍色和黃色色素),PCR反應后可以直接進行電泳。
本制品是添加了在常溫下能夠抑制DNA Polymerase活性和3’→5’exonuclease活性的抗體的Hot Start型DNA聚合酶。
另外,因為本制品具有校正活性,擴增的PCR產物大部分都是平滑末端。因此,不能直接進行TA克隆。 如果需要進行克隆,推薦In-Fusion克隆或克隆到平滑末端載體。如果想克隆到T載體上,則需要對3’末端進行dA加尾反應,推薦使用Mighty TA-cloning Reagent Set for PrimeSTAR®(Code No. 6019)。
【補充】
本制品與In-Fusion克隆系統產品組合使用,可以在短時間內高效地將PCR片段克隆到任意載體上。
In-Fusion克隆可以使用In-Fusion Snap Assembly Master Mix(Code No. 638947)等系列產品(參見相關產品頁,了解詳情)。
 
■ 保存
-20℃。
※注意事項:
使用前請避免劇烈攪拌,輕輕顛倒混勻并離心集液至管底。
 
■ 特 點
· GC/AT rich、長鏈、粗提樣品等難以擴增的模板也能高成功率擴增
· 具有卓越的校對能力,保持了α型DNA聚合酶具有的高保真性
· 2X Premix型試劑,-20℃保存不會凍結,減少操作時間
· 添加色素試劑的版本(綠色),可視性好,可直接進行電泳,操作更簡便。
 
■ 用 途
PCR法的DNA擴增
特別推薦用于以下PCR擴增:
· GC-rich、AT-rich等普通酶難以擴增的模板擴增
· 10 kb以上的長鏈DNA擴增
· 動物組織(如小鼠尾)、植物組織、血液樣本等粗提樣品起始的擴增
· 核酸含量高的cDNA起始的擴增
· 以克隆為目的的目的基因和載體的擴增
 
■ 以cDNA為模板時,PCR的注意事項
根據cDNA合成反應液成分的不同,作為模板的cDNA加入到PCR反應液中,可能會出現沉淀。
cDNA合成推薦使用PrimeScript™ II 1st strand cDNA Synthesis Kit(Code No. 6210A/B)、PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix(Code No. 6215A/B)
 
■ PCR條件
TaKaRa Ex Premier DNA Polymerase(2×) 25 μl(final conc. 1×)
Primer 1 10~15 pmol(final conc. 0.2~0.3 μM)
Primer 2 10~15 pmol(final conc. 0.2~0.3 μM)
Template 10 pg ~ 750 ng(參照說明書中「推薦模板添加量」)

滅菌水 Up to 50 μl
 
 
GC/AT rich及10 kb以上的長鏈擴增,推薦2步法PCR
 
 
注1)避免使用含次黃嘌呤核苷堿基(Inosine)的引物
注2)退火溫度根據引物的Tm值來設定
 
*1 在對GC/AT rich和長鏈目的基因進行擴增時,建議進行94℃1分鐘的預變性
*2 在進行粗提樣品起始的擴增時,延伸時間推薦設定為1min/kb。
 
TaKaRa Ex Premier DNA
Polymerase/Dye plus
 
 
 
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