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產品選擇指南

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AAVpro® Freeze-Thaw Extraction Buffer (All Serotypes)
品牌 Code No. 產品名稱 包裝量 價格(元) 說明書 數量
Takara 6679 AAVpro® Freeze-Thaw Extraction Buffer (All Serotypes) 20 ml × 2 ¥1,385
無標題文檔
 
■ 制品內容
AAVpro Freeze-Thaw Extraction Buffer (All Serotypes) 20 ml×2
 
■ 制品說明
用于從AAV包裝細胞(活細胞或者冷凍細胞)中提取病毒的細胞懸浮液
· 適用于各種AAV血清型
· 高回收率
· 不需要超速離心等繁瑣操作
 
腺相關病毒(AAV)能夠將基因導入至增殖細胞和非增殖細胞中,尤其在非分裂細胞中可以實現長期表達。此外,由于它具有低免疫原性,也適合作為動物個體基因導入(in vivo transduction)工具。當使用AAV病毒進行動物個體基因導入時,使用高純度的病毒粒子是很有必要的,需要去除源自病毒包裝細胞和培養基的雜質。在向培養細胞導入基因時,使用純化后的AAV病毒可以消除雜質所帶來的影響。
 
AAVpro Freeze-Thaw Extraction Buffer(All Serotypes)是一種細胞懸浮液,用于通過凍融法從AAV包裝細胞(活細胞和冷凍細胞)中提取AAV病毒。使用本制品懸浮包裝細胞,只需要一次凍融操作就能高效提取各種血清型AAV病毒。與AAVpro Purification Pack Maxi (All Serotypes)( Code No. 6678)配合使用,可以在大約4個小時內純化并濃縮AAV包裝細胞中的AAV病毒,以獲得高純度AAV病毒,而無需超速離心等繁瑣操作。
 
■ 保存
-20℃
 
■ 實驗例
1. 純化后AAV純度測定
使用本制品,從包裝細胞中提取攜帶熒光蛋白ZsGreen1的各血清型(AAV1、AAV2、AAV5、AAV6)AAV病毒,并使用AAVpro Purification Pack Maxi (All Serotypes)(Code No. 6678)進行純化。純化后的AAV病毒使用AAVpro Titration Kit (for Real Time PCR) Ver.2(Code No.6233)測定病毒滴度,以1× 109 vector genome (vg)/lane上樣進行SDS-PAGE。結果顯示,SDS-PAGE上的主要條帶為AAV衣殼蛋白(VP1、VP2、VP3)。
 
 
2. 純化后AAV感染性能評價
使用通過上述實驗例「1. 提取純化后AAV(各種血清型)純度測定」獲得的各種血清型AAV病毒,感染293T細胞和HeLa細胞,評估其感染滴度。純化后的AAV病毒以10,000 vg/cell (AAV1, AAV2)、100,000 vg/cell (AAV5, AAV6)分別感染293T細胞和HeLa細胞,3天后進行流式細胞術分析。分析確認,使用本制品提取,經AAVpro Purification Pack Maxi (All Serotypes)(Code No. 6678)純化的AAV病毒依然保持其感染能力。
 
 
 
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