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告別RNA提取,方便快速的細胞材料qPCR!
 
從培養的細胞中提取RNA大約需要45分鐘,操作復雜,大部分研究人員卻仍然使用這種傳統的基因表達分析方法。
 
Takara給您一個全新的選擇!
快速、方便、簡單的操作體驗:CellAmp系列讓您能夠在10 分鐘內提取RNA,且操作極其簡單,最短1.5小時即可完成從RNA提取、反轉錄到qPCR的全過程。
 
 
CellAmp的特點,不只【節省時間】這一點!
細胞裂解代替RNA提取,無需加熱失活DNase,適用于高通量分析
·無需進行RNA提取,可直接以細胞為模板制備樣品。
·新品裂解液CellAmp? Direct Lysis set(Code No. 3738A)不需要反轉錄反應前DNase失活的熱處理操作,減少了操作的繁雜性。分析時間大幅縮短(最短約1.5小時)。
·適用于高通量分析。
 
iPS細胞等干細胞分化而來的細胞也可以使用
·通過對裂解buffer的改良,cell line化的貼壁細胞、懸浮細胞、原代培養細胞、各種干細胞、iPS細胞等均可以使用。
 
裂解液可長期保存
·新品CellAmp裂解液3738,增加了組分Stop Solution, 提高了裂解液的穩定性。
·-20℃可穩定保存6個月。
 
Real Time PCR試劑具有強抗阻害性和高特異性
·經典CellAmp裂解液3732,可兼容大多數Takara兩步法或一步法RT-qPCR試劑。
·新品CellAmp裂解液3738,搭配qPCR試劑TB Green? Fast qPCR Mix (Code No. RR430) 和Probe qPCR Mix (Code No. RR391), 實現了對PCR阻害物的強抵抗性。稍長的目的基因和高 GC 含量的目的基因也可以擴增。
 
下面我們用數據說話!
實驗例1.使用CellAmp與使用純化的RNA作為模板,結果有差異嗎?
【實驗方法】
·樣本:HeLa細胞、Jurkat細胞、HEK293細胞、NHDF細胞、iPS 細胞 (253G1, STO+)
·方法:使用CellAmp 試劑制備細胞裂解物 vs 常規柱法從每種細胞中純化total RNA。
·目的基因:每種細胞,對應使用包含88種生物通路相關基因和8種管家基因引物對的PrimerArray系列,進行RT-qPCR解析。
 
【試劑】
CellAmp Direct TB Green® RT-qPCR Kit (Code No. 3735)
 
【實驗結果】
以純化的total RNA作為模板得到的Ct值,與以CellAmp試劑裂解液作為模板得到的Ct值,相關性良好。
即使樣本是iPS細胞,使用CellAmp也可以輕松檢測基因表達水平。
 
實驗例2. CellAmp與其他品牌的同類產品比較,性能怎樣?
【實驗方法】
·樣本:HeLa細胞、Jurkat細胞、HEK293細胞
·試劑:CellAmp vs T公司同類產品
·操作方法區別:細胞裂解結束后,加入Stop Solution,吸打混勻。CellAmp無需其他操作;T公司產品需要額外室溫孵育2 min的步驟。
·該實驗比較了加入Stop Solution后孵育不同時間的Ct值。
孵育時間分別為:0 min,2 min,20 min,30 min,60 min
 
【實驗結果】
使用T公司產品時,Stop Solution后孵育2 min的步驟必不可少的,但結果依然可能不穩定,得到不同的Ct值。
使用CellAmp試劑時,添加Stop Solution后,無需在室溫下孵育細胞裂解液,操作更容易,并且可以獲得更穩定的結果。
 
細胞裂解、反轉錄、qPCR,您可以選擇所需的組分,也可以選擇完整解決方案。
CellAmp系列產品一直在默默努力,滿足您所想所需。
 
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·不同時期的iPS誘導細胞作為樣本,不純化RNA,qPCR效果是否依然出色呢?
·使用CellAmp進行不純化RNA的探針法qPCR,結果會不會遜于常規方法?
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